Autoevaluación TP Nº3

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Autoevaluación TP Nº 3 - Transformación de E. coli con el método de CaCl2

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À propos de Test

biología molecular

transformacion

bioquímica

66 fois fait

Créé par

Cecilia Di Capua

Argentina

Top 10 résultats

1

María Gabriela Mediavilla

6 Mai 2020

03:25

temps

85

but

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Autoevaluación TP Nº3Version en ligne Autoevaluación TP Nº 3 - Transformación de E. coli con el método de CaCl2 par Cecilia Di Capua 1 De las siguientes aseveraciones, es INCORRECTO afirmar que: Escoge una o varias respuestas a Solamente las bacterias transformadas con el plásmido sobrevivirán en las placas con ampicilina b Las bacterias transformadas expresarán la proteína GFP en las placas que contienen ampicilina c Un reducido porcentaje de las células incorporan el plásmido durante la transformación d Las células que no se transforman no pueden crecer en las placas con ampicilina 2 La selección de las células que se han transformado con el plásmido pET-MBP-GFP se realiza observando el crecimiento en placas que contienen a IPTG b Ampicilina c Cloruro de Calcio 3 Después de realizado el choque térmico, las células se incuban 5 minutos en hielo: a Para permitir la expresión de la GFP b Para permitir que las células se enfríen y no mueran por la alta temperatura c Para sellar los poros transientes de la membrana por los cuales ingresó el ADN 4 El choque térmico: a A- Se realiza a 42 ºC b B- Es el procedimiento utilizado para favorecer la captación de ADN c C- Se realiza para hacer crecer y proliferar las bacterias d D- A y B son correctas 5 El plásmido pET-MBP-GFP utilizado para transformar, lleva entre otros genes: a A- El gen gfp que codifica la proteína verde fluorescente b B- El gen bla que codifica una proteína que proporciona a la bacteria resistencia al antibiótico ampicilina c C- El gen que codifica para la proteína ORI d D- A y B son correctas 6 En ausencia de IPTG en la placa de cultivo las colonias bacterianas expuestas a la luz ultravioleta son de color: a Blancas b Verdes c Rojas d No crecen 7 Después de realizado el choque térmico e incubar 5 minutos en hielo, las células se incuban 30 minutos a 37 ºC con medio de cultivo para: a A- Permitir la expresión del marcador de selección b B- Permitir que las células se recuperen y no mueran por el shock c C- Permitir la expresión del gen GFP d D- A y B son correctas e E- B y C son correctas Explicación 1 Solo las células que hayan incorporado el plásmido pET-MBP18 o pET-MBP18-GFP van a crecer en medio con Amp 2 El marcador de selección en nuestro ensayo es el antibiótico Ampicilina 5 El Plásmido pET-MBP18GFP expresa la proteína fusionada GFP-MBP y la proteína que aporta resistencia a Amp codificada por el gen bla 6 Para que se exprese la GFP (que fluoresce al recibir luz UV) es necesario adicionar IPTG. En ausencia del inductor las colonias son blancas.

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Autoevaluación TP Nº 3 - Transformación de E. coli con el método de CaCl2

par Cecilia Di Capua

De las siguientes aseveraciones, es INCORRECTO afirmar que:

Escoge una o varias respuestas

Solamente las bacterias transformadas con el plásmido sobrevivirán en las placas con ampicilina

Las bacterias transformadas expresarán la proteína GFP en las placas que contienen ampicilina

Un reducido porcentaje de las células incorporan el plásmido durante la transformación

Las células que no se transforman no pueden crecer en las placas con ampicilina

La selección de las células que se han transformado con el plásmido pET-MBP-GFP se realiza observando el crecimiento en placas que contienen

IPTG

Ampicilina

Cloruro de Calcio

Después de realizado el choque térmico, las células se incuban 5 minutos en hielo:

Para permitir la expresión de la GFP

Para permitir que las células se enfríen y no mueran por la alta temperatura

Para sellar los poros transientes de la membrana por los cuales ingresó el ADN

El choque térmico:

A- Se realiza a 42 ºC

B- Es el procedimiento utilizado para favorecer la captación de ADN

C- Se realiza para hacer crecer y proliferar las bacterias

D- A y B son correctas

El plásmido pET-MBP-GFP utilizado para transformar, lleva entre otros genes:

A- El gen gfp que codifica la proteína verde fluorescente

B- El gen bla que codifica una proteína que proporciona a la bacteria resistencia al antibiótico ampicilina

C- El gen que codifica para la proteína ORI

D- A y B son correctas

En ausencia de IPTG en la placa de cultivo las colonias bacterianas expuestas a la luz ultravioleta son de color:

Blancas

Verdes

Rojas

No crecen

Después de realizado el choque térmico e incubar 5 minutos en hielo, las células se incuban 30 minutos a 37 ºC con medio de cultivo para:

A- Permitir la expresión del marcador de selección

B- Permitir que las células se recuperen y no mueran por el shock

C- Permitir la expresión del gen GFP

D- A y B son correctas

E- B y C son correctas

Explicación

Solo las células que hayan incorporado el plásmido pET-MBP18 o pET-MBP18-GFP van a crecer en medio con Amp

El marcador de selección en nuestro ensayo es el antibiótico Ampicilina

El Plásmido pET-MBP18GFP expresa la proteína fusionada GFP-MBP y la proteína que aporta resistencia a Amp codificada por el gen bla

Para que se exprese la GFP (que fluoresce al recibir luz UV) es necesario adicionar IPTG. En ausencia del inductor las colonias son blancas.

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De las siguientes aseveraciones, es INCORRECTO afirmar que:

Escoge una o varias respuestas

La selección de las células que se han transformado con el plásmido pET-MBP-GFP se realiza observando el crecimiento en placas que contienen

Después de realizado el choque térmico, las células se incuban 5 minutos en hielo:

El choque térmico:

El plásmido pET-MBP-GFP utilizado para transformar, lleva entre otros genes:

En ausencia de IPTG en la placa de cultivo las colonias bacterianas expuestas a la luz ultravioleta son de color:

Después de realizado el choque térmico e incubar 5 minutos en hielo, las células se incuban 30 minutos a 37 ºC con medio de cultivo para:

Explicación