Para inducir la expresión de una proteína usando el sistema E. coli BL21 (DE3)/pLysS uso:
A.
Ampicilina
B.
Amp + Cn + IPTG
C.
IPTG
D.
Amp + IPTG
E.
Cloranfenicol
F.
X-gal
2.
El inductor se agrega:
A.
Al cultivo ON
B.
Al comenzar el subcultivo el día siguiente a partir del inóculo ON
C.
Luego de exactamente una hora de cultivo
D.
Cuando el cultivo llega a DO adecuada
E.
Luego de 2 hs a partir de que el cultivo llegue a la DO adecuada
3.
¿Cuándo colecto la muestra correspondiente al tiempo 0 de INDUCCIÓN?
A.
Del cultivo ON a primera hora de la mañana
B.
Cuando comienzo el cultivo de 10 mL a partir de un inóculo ON
C.
Inmediatamente antes o después de agregar IPTG
D.
Luego de 2 horas de agregar IPTG
4.
¿Por qué se hace un cultivo con una cantidad conocida de un cultivo saturado (ON) en lugar de iniciar un cultivo de mayor volumen a partir de 1 colonia aislada? *Marca las respuestas correctas*
A.
Para disminuir y tener mejor control del tiempo de cultivo para llegar a DO = 0,4
B.
Para ahorrar antibióticos e IPTG
C.
Para evitar abrir muchas veces la placa con las colonias transformantes
D.
Para dar reproducibilidad a los experimentos de expresión
5.
¿Hubiera sido correcto agregar IPTG a las placas de LB - agar -Amp-Cn usadas en la transformación?
A.
No, porque solamente debemos seleccionar las transformantes
B.
Sí, porque además de seleccionar las transformantes puedo observar en qué colonias se expresa GFP y elegir esas para realizar la inducción en cultivo líquido
C.
No, porque la expresión de GFP impediría el crecimiento de las transformantes
D.
Sí, porque lo necesito para seleccionar las transformantes
